megszerzése kallusz
- Az első fázis - a gyors növekedés a kallusz sejtek, védi az a hely, a vereség;
- A második szakasz - a tárolási a tápanyagok a sejtekben a kallusz;
- Harmadszor, a legfontosabb fázisa - a regenerációs kalluszszövetet elvesztett szerveket (gyökerek és hajtások).
Jelenleg a kallusz szövetet in vitro nyerhetők szinte minden élő növényi szövetben. Közös tényező hatékonyságának meghatározásában szövet-explantátum dedifferenciálódása és fejlesztése az elsődleges bőrkeményedés, a következők:
- A genotípus a szülő növény. Ebben az osztályban a vonal egy fajon belül is jelentősen változhat.
- Epigenetikai jellemzése explantátum, beleértve a homogenitási vagy heterogenitása a szövet miatt a sejtek különböző csoportjainak.
- Környezeti körülmények között, amelyek közül a legfontosabb exogén növekedési szabályozók (fitohormonok előnyösen), és a ható anyagok, mint az anti-blokkoló kiválasztási explantátumokat callusogenesis anyagok (aktív szén, antioxidánsok).
Meg kell jegyezni, hogy a megjelenése a tumorok által okozott talaj Agrobacterium Agrobacteriumtumefaciens, is jár a szöveti károsodás a növények. Morfológiailag sejtek tumorszövet is közel a kallusz. Azonban, az anyagcserét a tumorsejtek jelentősen eltér kalluszban genomjába bevitt gének Ti- plazmid baktériumok, különösen a szabályozó gének szintézisét citokininek és auxinok (Rol-gének). Szabályozása alatt termelt növényi hormonok „ok” sejtek folyamatosan osztódnak és „áttétet” primer tumor. Munka más beillesztett gének Ti-plazmid vezet az a tény, hogy a tumor sejtek kezdenek szintetizálni anyag idegennek - álláspontja az, hogy a sejt önmagában nem lehet értékesíteni, de amely táplálékul szolgál a baktériumok. Így, folytonos reprodukálás hatása alatt a kényszerített szintetikus opin szintézis és fitohormon teszi tumorsejtek eltérő kallusz.
A formáció explantátum-sejtek in vitro kallusz szövetet kell folyamaton mennek át a de-differenciálódás, t. E. elvesztése a sajátos jellemzőit az eredeti anyag.
Hozzáadása a környezetre exogén hormonok vezet a tetején a kallusz képződését. Érdemes megjegyezni, hogy az exogén hormonok auxin és citokinin hatékonyan fellépni csak egy bizonyos sorrendben. Jellemzően, az első közeg hozzáadandó auxin és citokinin majd; Ez vezet a sejtosztódás és a hegképződés. Az inverz szekvencia nem kialakulásához vezet kallusz.
Miután indukáló kallusz képződését aszeptikus körülmények között, el van választva, és felületére helyezzük a közeg. Ennek eredménye egy steril kultúra kallusz szövetet. Kallusz szövetet lehet tartani kultúra végtelenségig hosszú ideig, időnként osztja azt töredékek és kiültetés az új környezethez.
kallusz-képződés lép fel a primer vagy szekunder merisztéma és parenchyma szomszédos ez a másodlagos merisztéma vagy vaszkuláris szövetekben. Ez a folyamat méretétől függ az explantátum és sejtalkotók. Sok szövetek élettani polaritás. Nyilvánvaló, ezzel kapcsolatban kallusz képződik gyorsabban oldalán az explantátum, amely szemben az anya növény gyökere, így a készítmény a kallusz fragmentumok sárgarépa gyökér explantumokat agarra helyeztünk apikális oldalán. Abban az esetben, izolálás az explantátumot gumók (csicsóka, burgonya), a polaritás nem jelentős. Ahhoz, hogy teljesen megszünteti a befolyása a polaritás articsóka explantumokat hozhatók felületén a közeg tangenciális (NitschJ.P. NitschS. 1956).