A meghatározott számú nucleolusok ketrec

Mint már említettük, minden sejt rendelkezik a szükséges intranuclearis szerkezet - nukleoluszokban. Ez általában egy kis számú kivételtől eltekintve, amelyek, mint látni fogjuk, csak hangsúlyozni a fontosságát és szükségességét a részvételt a nucleolus élő sejtekben szállítmányok. Ezek a kivételek közé tartozik a tojás cellahatároló ahol nukleoluszokban hiányoznak a korai szakaszában az embriogenezis vagy sejtek, a fejlesztés befejezéséhez és visszafordíthatatlanul szakosodott, mint például bizonyos vérsejtek.

Más esetekben a sejtet figyeltünk 1-5 nucleolusok, és számuk nem feltétlenül állandó, még ugyanazon sejttípus. Sőt, néhány csírasejtek (oocitákat növekvő) száma nucleolusok elérheti a több száz, azaz két nagyságrenddel nagyobb, mint a környező szomatikus sejtek. Ez - az úgynevezett Erősítés nukleoluszokban.

Még a 30-as években azt feltételezték, hogy a szám attól függ, hogy hány nucleolusok „nucleolaris szervező” - speciális területek, amelyeken ott van telofázisban daganata nukleoluszokban interfázis sejtmagban. Gyakran nukleoláris rendezők lokalizált szekunder konstrikciót kromoszómák (kromoszómák alkotnak másodlagos szűkület). Tehát az emberi nukleoláris szervezők vannak elrendezve rövid karok 13, 14, 15, 21 és 22 kromoszómák (diploid beállított 10) (ábra. 82). Az emlősök, ott általában több nukleoláris kromoszómák diploid készlet: a macska - 2; sertés - 2; egér - 4; egy tehén - 8. hidegvérű gerincesek és madarak általában csak egy pár nucleolaris kromoszómák.

Így a maximális számú nucleolusok különböző sejtekben száma határozza nucleolaris szervező és növelhető a ploidia a nucleus: nagyszámú polyploid magok mindig nagyobb nucleolusok.

Ez a szabály megerősíti közvetlen megfigyelések mutáns egyének eltérő számú nucleolaris szervező. Tehát karmos béka normálisak egy diploid sejt két kromoszóma és nucleolaris nucleolus 1-2 ill. A heterozigóta egyének nucleolaris kromoszóma - 1 homozigóta mutáns lárvák, amelyek nem nucleolaris szervező, nucleolusok nem fordul elő, és nincs rRNS szintézisét. Hasonló megfigyeléseket kaptunk különböző számú gyümölcslegyek nucleolaris kromoszómák 0-4.

Lokalizálása nucleolaris szervező meghatározni meglehetősen pontosan a mitotikus kromoszómák ezüsttel festettük sók, amelyek specifikus affinitással néhány nukleoláris fehérjék. Pontosabb definíció nukleoláris szervező útján molekuláris hibridizáció in situ. Mivel tríciummal jelzett rRNS érintkezik a denaturált DNS előkészítése a mitotikus kromoszómák termel DNS-rRNS hibrid csak azokon a helyeken, ahol van egy DNS-szekvenciával komplementer rRNS.

A legtöbb esetben a sejtek száma a nukleoluszokban kisebb száma nucleolaris szervező. Ez annak köszönhető, hogy az a tény, hogy azok fuzionálnak egyet egymással daganat általános szerkezetét nucleolusok, azaz Ezek a vegyületek kombinálhatók egy olyan térben külön nukleoláris rendezők különböző kromoszómán interfázisban sejtmagba. Tehát az emberi szövet sejtjei is előfordulhat egyetlen nucleolus. Ez azt jelenti, hogy tíz nucleolaris oldalak lókusz a diploid kromoszómaszám része egyetlen nucleolus. Összevonása nukleoluszokban egymással jól szemlélteti az élő szövet sejtjeinek egy time-lapse fotózás.

Több riboszóma gének

Abban a vizsgálatban, nucleolusok különböző kromoszómaaberrációt, azt találtuk, hogy a törés a kromoszóma helyett a másodlagos szűkület nucleolusok is előfordulhat az egyes kromoszóma töredékek. Így, amikor részeket kicserélik két kromoszómák microsporocytes kukorica, abban az esetben, ha a rés az egyik kromoszóma keresztül történt nukleoláris szervező, volt két kromoszóma, amelyek mindegyike során egy része az eredeti nukleolusz szervező. Ebben az esetben, a két kromoszóma képesek alkotnak nucleolusok, bár különböző mértékben. Ezekből a megfigyelésekből azt tette nagyon fontos következtetés (amely teljes mértékben megerősítette a molekuláris biológiai szinten a 60-as), amely nukleoláris szervező nem egy pont kromoszómális lókusz, és többszöröse annak szerkezetét, tartalmaz több azonos gént adagokban ez felelős a kialakulását a nucleolus.

A molekuláris hibridizáció, kimutatták, hogy a genomok eukarióta riboszómális gének által képviselt több száz vagy több ezer egység; tartoznak a frakció mérsékelten ismétlődő DNS-szekvenciák. Még a genomban a baktériumok lehetnek több (6-7) szétszórva a genom azonos szekvenciákat szintéziséért felelős rRNS. A teljes mennyisége ebben a frakcióban a DNS (rDNS) E. coli-ban körülbelül 1% a teljes DNS-t. Eukarióta szervezetek, ez a százalék lehet 0,18 X. laevis. 0,4 -, hogy az ember Drosophila 1.3, 5.5 a sütőélesztő. A száma riboszomális gének eukariótákban sokkal több, mint a prokarióta sejtek. Táblázat. 10. ábra néhány példát rRNS gének különböző eukarióta képviselői.

10. táblázat száma riboszóma gének haploid kromoszómák

Gerinchúrosakról Emlősök Madarak: Kétéltűek: Halak: gerinctelenek Tüskésbőrűek Rovarok: Kagylók: A fonálférgek: Just Higher Plants: Gombák: Algák: Slizneviki:

Eljárás használatával a molekuláris hibridizáció nem csak a száma riboszomális gén elemeztük, de a lokalizáció. Ezekből a kísérletekből az következik, hogy zónák nukleoláris szervező másodlagos szűkületek Xenopus kromoszómák tartalmaznak riboszomális gének és, hogy minden ilyen rendezők tartalmaz körülbelül 300 géneket, vagyis nukleoláris szervezők policisztronos területek sokaságát tartalmazó azonos gének (poliizogennye részeket). Következésképpen, riboszomális gének össze vannak csoportosan vagy klaszterek.

Figyeljük közvetlenül a sorrendben a riboszomális gén DNS-t izoláljuk nucleolusok elektronmikroszkóppal nem extra nukleoluszból kétéltű oociták.

Jellemzően, a számot a riboszomális RNS-gének a genomban állandó, nem változik attól függően, hogy a transzkripció szintjén ezen gének. Tehát sejtek nagy metabolikus száma rRNS gén pontosan ugyanaz, mint a sejtek száma a teljes megszüntették szintézisében riboszómák. Amikor a DNS-replikáció in S-időszakban következik be, és a megduplázódása a rRNS gének, így számuk korrelál sejt ploiditás.

Vannak azonban olyan esetek, amikor rRNS-gének kitéve túlzott replikáció. A további replikáció RNS-géneket fordul annak érdekében, hogy a termelés nagyszámú riboszómák. Ennek eredményeként a túltermelés rRNS gén másolatok meglazulnak, extrakcióhoz. Ezek az extrakromoszomális kópiák az rRNS-gének függetlenül tud működni, így egy további mennyiségű szabad nucleolusok, de szerkezetileg nem rokonok a nukleoláris kromoszómák. Ezt a jelenséget nevezzük erősítés az rRNS-gének. Különösen részletesen tanulmányozták ezt a jelenséget a növekvő kétéltű petesejtek, bár előfordul mind az állatok és növények.

Tehát X. laevis. legalaposabban tanulmányozott és népszerű tárgya rDNS amplifikáció történik profázis I érését Division, ha a szintézist a kromoszomális DNS-t hosszú időn keresztül. Ebben az esetben, az összeg az amplifikált rDNS (rRNS vagy gének) válik 3000-szer nagyobb, mint elszámolni egy haploid számú rDNS, és megfelel a 1,5 x 10 6 rRNS-gének. Ezek létszám extrakromoszomális kópiák és a forma több száz további nucleolusok növekvő petesejtek. Átlagosan egy további kernel esik több száz vagy több ezer rRNS-gének.

Az amplifikált nucleolusok is megtalálhatók az oocitákban a rovarok. Tehát határolt víz bogarak megfigyelt petesejtek 3 x 10 6 extrakromoszomális másolatai rRNS-gének.

A biológiai jelentősége megjelenése létszám extrakromoszomális nukleoluszaiban petesejtek növekedése során elég világos: szintetizálása egy hatalmas számú helyettesítő termékek használhatók korai szakaszában embriogenezis, illetve kell egy hatalmas számú riboszómák amely előállítható a cellában ezen további mátrixok erősített számos nukleoluszokban. Időszak után érés a petesejt, ha két egymást követő megosztottság e további nukleoluszaiban mitotikus kromoszómák nem tartalmazza, azokat elválasztjuk a magok új és lebomlik. Következésképpen erősítés rDNS a petesejt egy átmeneti jelenség, nem befolyásolja a állandóságát a genomban.

Az alacsonyabb rendű eukarióta szervezetek betartják extrakromoszomális nukleoluszokban. Tehát Tetrachymena pyriformis részeként a haploid genom mikronucleus csak egyetlen rRNS gén. Ugyanez Macronucleus ez az organizmus tartalmaz körülbelül 200 haploid ekvivalens extrakromoszomális másolatai. Élesztősejtekben is találhatók extrakromoszomális másolatai rRNS gének ciklikus DNS-molekula körülbelül 3 mikron hosszúságú, amely egy rRNS gén.