Elektroforézis papíron lehetővé teszi, hogy külön aminosavak aszerint, hogy azok az elektromos töltés

5.17. Elektroforézis papíron lehetővé teszi, hogy külön aminosavak aszerint, hogy azok az elektromos töltés

A legegyszerűbb módszer elválasztás aminosav papíron elektroforézissel (ábra. 5-13). Egy csepp tartalmazó vizes oldat aminosav-keveréket, alkalmaznak a szalag megnedvesített szűrőpapíron puffer egy adott pH-nál. További erre szalag magas feszültség kerül, ami egy erős elektromos mező. Mivel a különbségek értékeinek aminosavak mentén mozgatjuk a szalag egyik vagy másik irányba a különböző sebességeket pH-értékétől függően a puffer-rendszer, és az alkalmazott feszültség.

Ábra. 5-13. Aminosavak elválasztását papírelektroforézissel. A papírcsíkot alkalmazzák egy csepp tartalmazó aminosav-keveréket oldatot. Ez hagyjuk megszáradni, amely után a papírszalagot megnedvesítjük puffert egy adott pH-érték és zavarja a hűtőlemezek. A végén a csíkok merítjük egy cellába elektródok, és tartalmaz egy nagyfeszültségű. Ebben merül fel, amikor egy állandó elektromos mező aminosavakat elkülönítjük aszerint, hogy azok teljes elektromos töltés a kiválasztott pH-n. Aminosavak, hogy amikor ez az érték pH jelentése kationok vándorolnak a katód (negatív pólus), és aminosavak formájában anionokat elmozdulni az anód (pozitív pólus), amint azt a reakcióvázlat mutatja elektroforetogramm időben. Végén a folyamat (a rendszer idő) a papírt szárítjuk, permetezzük ninhidrinnel és a hő, ami a papíron, amely megfelelő foltok helyét a különböző aminosavak, amelyek összehasonlítva azonosítottuk helyüket a helyzetét az autentikus alkalmazott aminosavakat „tanú”.

Például, pH = 1,0 hisztidin, arginin és lizin, hordoznak töltést + 2, és mozgassa, hogy a negatív töltésű katód gyorsabb, mint a többi aminosav, a díj megegyezik + 1. Másrészt, pH 6,0 pozitívan töltött aminosavak (lizin, arginin és a hisztidin ) elmozdulni a katód és a negatív töltésű (aszparaginsav és glutaminsav) -, hogy az anód. Minden más aminosavak vagy maradnak az alkalmazás helyén, vagy áthelyezni csak rövid távolság, mivel amellett, hogy az a-amino-csoport, és karboxilcsoport nincs más ionizálható csoportok; így izoelektromos pontja mindezen aminosavak gyakorlatilag megkülönböztethetetlen. Ezt bizonyítja táblázatban bemutatott értékekre. 5-4. Annak megállapítására, a helyzetét aminosavak elválasztottuk elektroforetogramm papírcsíkot szárítjuk, permetezzük ninhidrin (lásd. Alább), és melegítjük. Kék vagy lila foltok állt ki papíron, jelenlétére utal egy adott aminosav. Ugyanilyen körülmények között az elektroforézis minta ismert aminosav szolgáló „markerek”, amelyek lehetővé teszik, hogy meghatározzuk a jellemző egyes aminosavak pozícióját a electrophoregram (lásd. Ábra. 5-13).