Ejakulátum - meghatározása mennyiségi és minőségi jellemzői a sperma
Meghatározása a spermiumok mozgékonyságát.
Kinezisgramma - a százalékos spermiumok a ejakulátum különböző mobilitást. A több mozgásképes sperma fő kritérium értékeli azok hasznosságát. Használata ablak fonio megszámoltuk natív készítmény 100 spermiumok normális motilitást mennyiségű jelölés (normokinospermiya) attenuált (gipokinospermiya) és az álló (akinospermiya).
Száma spermiumok normális motilitást (transzlációs mozgásokat sebességgel 50 m / s) általában 80-90%, a legyengült (lassú transzlációs mozgás) - 10-12% -a rögzített - 6-10%.
A spermiumok jelenléte rezgőmozgásnak - diskinospermiya általában nem figyeltek meg.
Dinamikus kinezisgrammy 24 órán át, a százalékos mozgásképes sperma bizonyos időközönként. Normál spermaszám és a rendes kinezisgramma dinamikus teljesítmény, alacsony kinezisgrammy jelzik gyenge termékenység (asthenospermia).
Egy csepp sperma lerakódott üveglap, fordítsa fejjel lefelé, és tegye tárgylemezre egy félhold a függő csepp, hogy a csepp volt a központja a mélyedésbe. Az élek a fedőlemez van bekent vazelin és mikroszkóposán meghatározzuk a százalékos normo-, hipo- és akinospermii után 3, 6, 12 és 24 órával ejakuláció után. A vizsgálatot szobahőmérsékleten végezzük. Normális esetben, 3 óránként normokinospermiya 20% -kal csökken.
A mintát a „megújulás” a sperma.
Amikor akinospermii friss ejakulátum több mint 30% nemzőképességet, de csak akkor, ha ez lehetetlen „újraéleszteni” a sperma. Sikertelen próbálkozások, hogy „újraéleszteni” jelzi nekrospermii ingatlan spermiumok. Ahogy stimuláló ( „élénkítő”) lehet használni a következő megoldásokat:
1) Becker oldat: Glükóz - 3 g, Na2 HP04 - 0,6 g, NaCl - 0,2 g KH2 P04 - 0,01 g, desztillált víz - 100 ml (pH = 7,8);
2) 0,1% koffeint oldatot (koffein nem használható a kapszula);
3) 0,1 M arginin-oldat és mások.
A mintát a „hasznosítás” kell végezni párhuzamosan bármely két említett stimuláló megoldásokat.
Térfogati pipettával 1 ml nasasyvayut 0,1 ml sperma (jól kevert), amely után azonos erősítés pipettával 0,9 ml oldatban, bármilyen inger. Fújd a tartalmát a pipetta az óra üveg, alaposan keverjük össze a főtt készítmények függő csepp meghatározására dinamikus kinezisgrammy és megvizsgálja őket mikroszkóp alatt. Miután egy 5-10 percig mozdulatlanul, de élve sperma elkezd mozogni. Százalékos aránya motilis spermiumok meghatározzuk 24 órán át 2-3 óránként.
Számlálása spermatozoa 1 ml ejakulátumban vsemobeme.
A szám a spermiumok a ejakulátum Goryaeva megszámoltuk egy számláló kamra. Alaposan összekeverjük sperma egyre melanzher a leukociták számára a jelig 0,5 (hígítás 20-szor), majd a tárcsázáshoz jelölések 11 hígítási folyadék és töltse ki a Goryaev kamerát.
A hígítás a sperma felhasználásával a következők bármelyikét folyadékok: nátrium-hidrogén-karbonát: Nátrium-hidrogén-karbonát - 5 ml, koncentrált formalin - 1 ml, desztillált vizet - 100 ml (állíthatók elő anélkül, hogy a nátrium-hidrogén-karbonát, amely feloldására hozzáadunk nyálka); 2) Rubenkova folyadék: fő fuksin- 0,1 g, festék Romanovsky - 0,02 ml tömény karbolsavat-0,2 ml glicerint, 0,1 ml, finomított etil-alkohol - 2 ml, 1% nátrium-kloridot 100 ml. Előnyök Rubenkova folyadék abban a tényben rejlik, hogy a színek a sperma. Ez, valamint a számítás a teljes spermiumok számát, lehetővé teszi, hogy meghatározza spermiog. A szemlencse 7X és 40X objektív, számolni az összes sperma öt nagy négyzetek elrendezve átlósan (csak azokat a fejrész, amelyek ellen a szögletes), és szorozva 1 000 000. Az így kapott számot számának felel meg spermatozoa 1 ml sperma vizsgált. és a teszt-cső módszerrel lehet használni számlálási spermatozoák Goryaeva számláló kamrában.
Száma spermatozoa az ejakulátumban határozza meg számát megszorozzák a spermatozoák számát 1 ml ejakulátumban térfogata (ml). Általában, a számot a spermiumok a ejakulátum meghaladja a 150 Mill.
számlálás Eljárás egy Goryaev kamra számának meghatározásához motilis spermiumok. Ahhoz, hogy ezt a hígított spermiumokat meleg izotóniás nátrium-klorid-oldattal, és a számlálást a cella csak mozdulatlan spermatozoák, és utána a teljes spermiumok számát fix összeg kivonjuk.
Normális esetben, 1 ml sperma tartalmaz 60-120,000,000 hímivarsejtek át giperspermii - .. több mint 120 millió oligospermiával - 30-tól 60 Mill.
Meghatározni a valódi spermiumok számát van szükség, amikor oligospermiát
2-3 hivatkozási számlálási időszak
3-4 hét. Ugyanakkor hím spermaszám van kitéve nagy ingadozásokat élettani.
Spermiogram - a mennyiségi eredmények ondó vizsgálatát. Annak meghatározására, Spermiogram Pappenheim készítmények festettünk hematoxilinnel és eozinnal, és a számlálást egy mikroszkóppal immerziós rendszer legalább 200 sperma. Így lehetséges, hogy használja a gépet számláló leukogram. A normális sperma Normál sperma formák alkotják 80-85%, ezek közé tartozik a fiziológiás megvalósítási módok, amelyekre jellemző a szokatlan vagy beszűkült, vagy a redukált vagy kiszélesedő fej. Fiatal vagy éretlen spermiumok van formák a fej körül és a nyak citoplazmában maradékot (gallér „) figyelhető meg a gyakori szexuális közösülés, és nem képes megtermékenyíteni. Régi formák spermatozoa jellemezve hiperkróm, achromia vagy vacuolisatio fej jelenik meg a spermiumok hosszas absztinencia és megtermékenyítésre alkalmatlan.
Degeneratív (patológiás) formák hordozzák spermiumok deformációk fejek: megalospermatozoidy (gigantospermatozoidy) spermiumok két fejjel, de egy nyak és a farok, és anélkül, hogy a nyak egy vagy több farok nélkül farok, a farok fej nélkül és mások.
Egészséges férfi a normális sperma patológiás formái spermium általában nem találhatók, de néha számuk normál termékenységi eléri a 20%, amelynek mintegy 15% -a egy fej abnormalitás, 3-5% - 2-5% test és - farok.
Patológiás szekréciós spermatogenezis és a sperma meddőség találtuk előnyösen a patológiai a fej és a nyak. Patológiai farok általában kiválasztó eredetű, felmerül a járatokból a sperma a kóros elváltozásokat a vas utak. Normális spermatogenezisre spermiog sejtek alkotják 0,5-2%.
A fazovokontrastnok mikroszkópos sperma hígítjuk izotóniás nátrium-klorid-oldat kis mennyiségű 1% -os vizes rivanol vagy karbolsavat spermiumok mozgékonyságának csökkentésére.
Fluoreszcens mikroszkóppal mint fluorokrómhoz akridinnaranccsal hígításban 1: 20000 sperma natív könnyen megkülönböztethetők az élő színes, zöld, holt és festett narancssárga spermiumok. Megkülönböztetése normális és abnormális formáit spermiumok miatt morfológiai jellemzői könnyen.
Szabályzat munka fáziskontraszt és fluoreszcens mikroszkópia az utasításban leírtak szerint ezeket az eszközöket. Morfológiai formák spermiumok fáziskontraszt és fluoreszcens mikroszkópia véve azonos módon, mint a hagyományos fénymikroszkópos.
Útmutató a gyakorlati képzés a klinikai laboratóriumi diagnosztika / szerk. prof. MA Bazarnova, prof. VT Morozovoy.- K. Vyshcha iskola, 1988.- 318 p. 212 il.