Biológiai katalógus útmutató gyakorlati képzés Microbiology Page 21

Útmutató a gyakorlati képzés mikrobiológia

Eljárás alapuló előállítására mikroorganizmus növekedési közvetlenül mikroszkóp tárgylemezen, lehetővé teszi, mikroszkopikus megfigyelésével folyamatok a növekedés és fejlődés, a befolyása a mérgező és más szerek ezekre a folyamatokra. A készítmények nem zavarják a természetes helye a sejtek növekvő koloPreparat „függő csepp”. Egy csepp a szuszpenzió hurok vagy mikroorganizmusok hagyományos tollak visszük fel az üvegtábla van, mely elfordul legördülő és helyezzük egy speciális mikroszkóp tárgylemezt a bemélyedés (lyuk) a központban. Csepp kell lógni szabadon érintése nélkül az élek és az alján is. Az élek a kutak előkent vazelinnel. A csökkenés zárt nedves kamrában, amely lehetővé teszi a megfigyelés tárgyát képező sok napon át. A hosszú távú megfigyelések steril üveg, és a szuszpenziót a mikroorganizmusok elő folyékony tápközegben.

NII. Növekedési végezhetjük aerob vagy anaerob (fedőlemez) körülmények között.

Agar film lehet felvinni az üveglap és főzzük a gyógyszer „függő csepp”. Az ilyen készítményben lehet megfigyelni a mozgását a csúszó típusú baktériumok.

6.2.2. Készítmények rögzített megfestett sejtek mikroorganizmusok

Előállítás fix festett készítményekben a következő lépéseket tartalmazza: előállítunk egy kenet, szárítás, rögzítése és színező.

Előállítása kenet. A sovány alkoholt dia van elhelyezve egy kis csepp csapvízzel, és átvisszük egy kis mennyiségű ő hurok „összenyomódott csepp” az anyag, mind a gyógyszer. A kapott szuszpenziót egyenletesen kenetet hurok területe 1-2 cm2 lehetséges vékonyréteg. Kenet kell lennie olyan vékony, hogy kiszáradt főzés után.

Szárítás kenet. A legjobb, ha száraz a késztermék szobahőmérsékleten levegőben. Jól felkészült kenetet nagyon gyorsan szárad. Ha a szárítást kenet tartós, a gyógyszer lehet enyhén melegítjük egy jet a meleg levegő egy nagy láng égő, miközben a poharat kenet. • Ezt a műveletet kell elvégezni óvatosan, túlmelegedés nélkül a kenet, vagy mikrobiális sejtek deformálódott.

Rögzítése a gyógyszer több célja van: megölni mikroorganizmusok, azaz biztonságosan megtehető további kezelés, nem, b; és ..? jobb sejtek adhéziója az üveghez; hogy a kenet hajlamosabbak a festés, mint a halott sejtek festésére jobb, mint élő. A leggyakoribb módszer rögzítéséről hőkezelés. Mert ez a gyógyszer általában három alkalommal a legmelegebb a láng, gazdaság kenet gomb felfelé. Ne hevítsük túl a stroke, hiszen ebben az esetben változások történnek durva sejtstruktúrákat, és néha a sejtek megjelenése, például a zsugorodás. Annak vizsgálatára, finom szerkezetét sejtek igénybe rögzítésére különböző vegyi anyagok (lásd. Függelék). Namazok rögzítéséről folyadékot öntöttünk, vagy gyógyszer egy meghatározott ideig meríteni egy pohár tartó.

Színezés. A sejteket festjük mikroorganizmusok elsősorban anilin színezékeket. Megkülönböztetése savas és bázikus színezékek. A savas színezékek, amelyekben ion színezi (kromofór) - anion. A bázikus színezék kromofor egy kation. Ilyenek a savas színezékek eozin, eritrozin, Nigrosine, sav bíbor; Mindezek színezékek nagymértékben kötődik a citoplazmában etikai összetevői a sejt. Bázikus színezékek - metilénkék, bázikus fukszin, genciánibolya, kristályibolya, szafranin - intenzíven kötődnek a nukleáris komponensei sejtek. A magas koncentrációjú DNS-t és riboszomális RNS-baktériumok a sejtben teszi érzékenyebbek a bázikus színezékek. Ebben a tekintetben a mikrobiológiai gyakorlat szinte kizárólag az alap festékek.

Vannak egyszerű és eltérés festési eljárások a mikroorganizmusok számára. Egy egyszerű színt festeni az egész sejt, úgy, hogy az jól látható, az alakját és méretét. Eltérés festéssel sugallja nem minden sejt, és egyes szerkezetek. A különböző festési kiderül néhány sejt struktúrák és helyettesítő anyagok.

Egy egyszerű festés mikrobiális sejtek általában fukszin, genciánibolya, metilénkék. A fix készítményt az üvegre helyezett párhuzamos lécek fekvő felett küvetta, és a színezék öntünk 1-3 perc. Ügyel arra, hogy a festés alatti megoldás festék kenetet nem szárad ki. Ha szükséges, töltsön új kenetet a festék része.

Végére a készítmény a színes vízzel mossuk mindaddig, amíg az áramló víz színtelen. A készítményt ezután szárítjuk, levegővel vagy óvatosan blottoljuk szűrőpapírral, helyezünk a festett kenetben csepp immerziós olaj, és megtekinthető a lencse 90H- Ahhoz, hogy több tiszta készítményei, a színezék öntjük, kenet bevont szűrőpapíron. A kék festési eljárással a módosítás lehetővé teszi a használatát a festék megoldások helyett szűrőpapírt előzetesen áztatott egy festéket.

Egy megfelelően festett és jól mosott előkészítése terén fényes és tiszta, festett egyetlen mikrobiológiai sejtek. Fix és festett készítmények is „ujjlenyomatot”. Rögzített, festett készítmények tárolható hosszú ideig.

Az alakja sejtek, és ezek kombinációi (láncok, foglalatok, csomagok, és így tetrád. D.) Reveal, mint általában, készítmények „összenyomódott csepp” világos mezőben, vagy fáziskontraszt mikroszkóppal. Ahhoz, hogy meghatározzák a sejt alakját kis rúd alakú baktériumok, mint például a Serratia marcescens, előkészítése gyógyszert rögzített és megfestett sejteket egy egyszerű módon. A sejteket kis baktériumok, ahol a kiemelkedések (Stella nemzetségek, Caulobacter, Prosthecomi-crobium), célszerű megvizsgálni egy sötét mezőben. Természetes elrendezése sejtek kolónia mikroorganizmusok és spórák és spóratartók Actinomycetes és fonalas gombák tanulmány a gyógyszer „ujjlenyomat”.

Nem szabad elfelejteni, hogy a kor a táptalaj kompozíció és tenyésztési körülmények jelentősen befolyásolják, és a morfológiai citológia mikroorganizmusok.

6.2.3. Meghatározása mikrobiális cella méretei

mikrobiális sejtek mellett mértük a mikroszkóp szemlencsén vezetéken keresztül - okulármikrométer vagy mikrométer csavarral. A jobb felhasználása élő mérés, ahelyett, hogy a rögzített sejtek, mivel fixálás és festés a sejtek vezetnek egy bizonyos változás a valódi mérete. Kényelmesen meghatározzák a sejt mérete, fázis-kontraszt eszközt. Ha a sejtek mozgékonyak, készítmény vagy enyhén melegítjük a csepp a szuszpenzióhoz egy csepp 0,1% -os vizes agar oldatban. A cellaméret mikronban fejezik ki (mikron).

Okulármikrométer van egy kör alakú üveglap, amelynek van gravírozva középvonalában hossza 5 mm. A vonal van osztva 50 rész. Okulármikrométer helyezünk a szemlencse. Ehhez kicsavarva szemlencse szemészeti lencsét helyezzük annak apertúra okulármikrométer szétválására és becsavarva a lencsét. Azonban osztások okuláris mnkrometra nem közvetlenül mérik a sejtek mennyisége, mivel az utóbbi szemlélik át a lencse és a szemlencse, a választóvonal - csak a felső lencse szemlencse. Ezért mielőtt a mérési értékek a sejtek, akkor meg kell határozni a okulármikrométer osztályokba a nagyítás a mikroszkóp, hogy mi történik a segítségével egy objektív mikrométer.

A cél mikrométer (ábra. 53) - egy fém lemez egy lyuk a közepén. A lyuk behelyezett üveg, amelyen egy sor hossza 1 mm. Meg van osztva 100 rész, t. E. Division célja mikrométerrel megfelel 0,01 mm, vagy 10 mm-es. Annak megállapításához, az ár egy okulármikrométer divíziók objektív mikrométer kerül a mikroszkóptárgyasztalon és elsősorban kis nagyítás. sorkép átkerül a közepén a látómező, és csak ezután

módosíthatja az objektívet, amelyben fogja meghatározni a cella méretét. Mozgó mikroszkóptárgyasztalon és fordult a szemlencse mikrométer beállítani, hogy a mérleg, párhuzamos és egymást átfedik. Division értéket határoztuk meg okulármikrométer nóniuszos elvét, t. E. össze egyik szétválására az objektív és okulár mikrométer skála, és követi a kombináció (ábra. 54). Meghatározza a osztások száma az objektív mikrométer szemlencsét osztály megfelel 1

54. ábra meghatározása árak osztódó objektív

mikrometra- / - osztás az objektív mikrométer; 2 - a körzet egy okulármikrométer

Foot mikrométer. Például, elosztjuk az objektum-2 mikrométer (20 mikron) megfelelnek az 5 szétválására okulármikrométer tehát egy osztás szemlencse mikrométer 4 mikrométer (20: 5). Ha most fel a mikroszkóptárgyasztalon készítmény mikrobiális sejtek és úgy vélik, hogy ugyanolyan nagyítású, akkor lehet mérni a cella méretét. Ehhez határozza meg, mi több megosztottság a szemészeti vonal megfelel a nagyságát a mért tárgy, és szorozzuk ezt a számot elosztjuk az ára egy okulármikrométer.

Célszerű, hogy meghatározza a méret a sejtek egy csavarral okulár mikrométer MOB-1-15. Okulármikrométer csavar rögzítve a cső a mikroszkóp eltávolítása után a szemlencse. A szemlencse mikrométer csavarral rögzített osztásköz értékét 1 mm, hogy meghatározzuk a méretei nagy tárgyak és mozgó üveglemezre egy kereszt. A lemezt csatlakozik a MIC