Szerkezete ribonukleinsav (RNS)
A primer szerkezetét RNS érdekében ribonukleozidmonofosfatov váltakozás a polinukleotid láncon. A RNS-t, mint a DNS, nukleotid kapcsolt 3”, 5'-foszfodiészter kötések. A végén a RNS polinukleotid láncok változhat. Az egyik végén van egy OH-csoportot foszforilált 5'-szén atom a másik végén - OH-csoport a 3'-szénatom ribóz, úgynevezett végeredménye 5 „és 3” végeinek az RNS lánc.
A másodlagos szerkezet RNS
Ribonukleinsav molekula épül azonos polinukleotid láncon. Külön részletekben RNS láncok hurkokat alkotnak spiralizált - „hajtű” miatt hidrogénkötések között komplementer nitrogéntartalmú bázisok A-U és G-C. Részei az RNS-szálat ezeken a helikális struktúrák antiparalel, de nem mindig teljesen komplementer, úgy találták, párosítatlan nukleotidot vagy egyszálú hurkok, amelyek nem illeszkednek a kettős spirál. A jelenléte spiralizált területek jellemző minden típusú RNS.
A harmadlagos szerkezete RNS
Az egyszálú RNS-t jellemzi egy kompakt, rendezett harmadlagos szerkezet eredő reakciójával spiralizált másodlagos szerkezeti elemeket. Így a formáció további hidrogénkötések között nukleotidot kellően távol egymástól, vagy kötvények közötti OH-csoportok a ribóz maradékanyagok és bázisok. A harmadlagos szerkezetét az RNS-t stabilizáljuk kétértékű fémionok, például ionok Mg2 +, kötő nem csak foszfáttal csoportok, hanem bázisokkal.
A főbb típusai a RNS
A sejtek citoplazmájában tartalmazza 3 típusú RNS - szállítási RNS (tRNS), hírvivő RNS (mRNS) és a riboszomális RNS (rRNS). Ezek különböznek az elsődleges szerkezet, molekulatömeg, konformáció, a hosszú élettartam és az, ami a legfontosabb, a funkcionális aktivitás.
Meghatározási módszerei a primer és szekunder szerkezete nukleinsavak
Sekvenirovanie- az általános neve a módszerek, amelyek lehetővé teszik, hogy a nukleotid szekvencia, egy DNS-molekula. Jelenleg nincsenek megfelelő módszer, hogy működni fog az egész a DNS-molekula; vannak elrendezve az alábbiak szerint: először elkészítjük nagyszámú kis szakaszok DNS (klónozott DNS-molekula ismételten és „cut” be véletlenszerű helyeken), majd olvassa egyes szakaszok külön-külön.
Mindezek a hatások kapunk elsősorban a hőmérséklet-változások a DNS-keverékhez, primerek és polimerázok; céljainknak fontos, hogy ez egy meglehetősen pontos folyamat, és a hibák voltak ritkák, és a kimenet egy nagy példányszámban részeinek azonos DNS-t. Különböző szekvenálási eljárások különböznek egymástól nem klónozással, de hogyan akkor olvassa a kapott „leves” a több példányban az azonos DNS-t.
DNS-DNS módszerrel gibridizatsiiosnovan az a tény, hogy a DNS-DNS-duplex stabilitását egy adott hőmérséklet függ a nukleotidok száma képező komplementer párokat. Nyilvánvaló, hogy a száma komplementer nukleotidok a duplex, ahol mindkét szál származhatnak ugyanabból a DNS-molekula (azaz, a módosított vagy hasított) egyenlő 100%. Ha mindkét menetek különböző eredetű (heteroduplex), majd attól függően, a mutációk számát történt, száma komplementer párok kevesebb lesz, mint 100%. Ennek megfelelően heteroduplexek kell bomlani (olvad) alacsonyabb hőmérsékleten, mint a módosított vagy hasított. Ezen túlmenően, az alacsonyabb olvadási hőmérséklet, annál nagyobb a különbség a két szekvencia. Hőmérséklet stabilitás hibrid DNS által meghatározott hőmérséklet, amelynél 50% a hibrid DNS disszociált egyszálú formában. Ezután a hőmérsékletet összehasonlítjuk az átlagos hőmérséklet 50% Op a módosított vagy hasított mindkét típusú érintett szekvenciák kialakulását heteroduplex, ezen a hőmérsékleten általában jelöljük Tm. A különbség a medián olvadáspontja hetero- és a módosított vagy hasított jelöljük DTM. DTM ábra egy lineáris függés száma páratlan bázisokat (Britten és munkatársai 1974 ..): P = cdTm. A konstans c általában határozza meg a feltételeket, a kísérlet, és jellemzően tól 0,01-0,015. Meghatározása DTM igényel nagy számú ismétlés, mivel nagy kísérleti hiba.
A fő jellemzője a DNS képes szaporodni.
1.9. A DNS-replikáció, transzkripció, transzláció, reverz transzkripció. A DNS amplifikációját. Protein-bioszintézis, aminosav kód. Szervezése gének, a szerkezet a gének prokarióta és eukarióta, a fogalom a klónozás.
Replikatsiya- az a folyamat, az ön-megduplázódása DNS molekulák származó enzimek ellenőrzés alatt. Replikáció előtt végezzük minden osztódó sejtmagban. Ez azzal kezdődik, az a tény, hogy letekeredik a DNS hélix átmenetileg az intézkedés alapján a DNS-polimeráz enzim. Mindegyik lánc után alakultak szakadás hidrogén kötések, alapján a komplementaritás szintetizált leány DNS-szálat. Képek vannak az a nukleotid szintézisben, amelyek a sejtmagban.
Reakcióvázlat DNS-replikáció
Így minden polinukleotid lánc szolgál egy sablont az új komplementer szálat (és ezért a folyamat a duplájára DNS molekulák utal reakciók mátrix szintézis). Az eredmény két DNS-molekulákat, amelyek mindegyike az egyik szál a kiindulási molekula a (fél), és a másik - az újonnan szintetizált. Sőt, az egyik új láncot szintetizálunk szilárd, és a második - az első formájában rövid fragmentumok, amelyeket azután varrt hosszú láncú specifikus enzim - DNS-ligáz. Ennek eredményeként, replikáció, két új DNS-molekulák pontos másolata az eredeti molekula.
Replikatsiizaklyuchaetsya biológiai értelemben pontos továbbítása örökletes információt szülő sejteket lánya, ami mi történik, ha a szétválás a szomatikus sejtek.
1) N. Greene, William Stout, D. Taylor - Biology.
2) ZA Snabarova és AA Bogdanov - Chemistry nukleinsavak és azok polimerek.
3) az AP Pekhov - Biológia és Általános ginetika.
4) A. Mickelson - Chemistry of nukleozidok és nukleotidok.
5) H. Hauptmann, J. Graefe, H. Remane - Szerves kémia
Transkriptsiya- ezt a folyamatot sintezaRNKs ispolzovaniemDNKv sablonként származó minden élő sejtben. Más szóval, ez a genetikai információ átadását a DNS-től az RNS.
TranskriptsiyakataliziruetsyafermentomDNK-függő RNS-polimeráz. A folyamat az RNS-szintézis megy végbe az irányba, az 5'-, hogy a 3'-végén, azaz DNKRNK-polimerazadvizhetsya a templát szál irányába 3'-5”.
Átírási kezdési tartoznak azok a lépések, a nyújtás és megszüntetését. Transzkripciós egység transzkripciós, DNS-fragmens, amely a promotert, az átírt rész és a terminátor.
Megindítása transkriptsii- egy komplex folyamat, amely attól függ, hogy a DNS-szekvencia közelében az átírt szekvencia (egy ueukariottakzhe és a távolabbi régiók a genom -enhanserovisaylenserov), és a jelenléte vagy hiánya razlichnyhbelkovyh tényezők.
Abban a pillanatban, az átmenet az RNS-polimeráz transzkripciós iniciációs megnyújtással bizonytalan. Három fő biokémiai események jellemző az átmenet az RNS esetében polimerazykishechnoy coli: elválasztó szigma faktor pervayatranslokatsiyamolekulyfermentavdol mátrix és erős stabilizálása a transzkripciós komplex, amely amellett, hogy az RNS-polimeráz, azzal jellemezve, növekvő RNS lánc és egy átírt DNS-t. Ezek a jelenségek a tipikus eukarióta RNS polimerázok. Az átmenet a megkezdése a nyúlás kíséri zavar közötti kötések az enzim, promoter, transzkripciós iniciációs faktorok, és bizonyos esetekben - transzfer RNS-polimeráz állapotban hatáskörükről nyúlás. Nyúlás fázis után ér véget a kibocsátás a növekvő transzkriptum idissotsiatsiifermenta a mátrixból (terminációs).
Lépésben vDNKraspleteno nyúlásnál körülbelül 18 parnukleotidov. Körülbelül 12 nukleotid a DNS-templát szál hélix olyan hibridet képez a növekvő végén az RNS-szálat. Amint mozgást RNS-polimeráz egy mátrixon előtte van Lecsévélés és mögött - csökkentése a DNS dupla helix. Egyidejűleg egy másik kapcsolatot oldják RNS komplex növekvő láncot a sablont, és az RNS-polimeráz. Ezeket a mozgásokat kell kísérnie relatív forgás az RNS-polimeráz és a DNS-t.