vörösvértest fenotipizálás
Kevésbé immunogén antigének eritrocita
Phenotyping vörösvértest antigének K és
A legjelentősebb antigén tulajdonságai között vörösvértest antigének kismértékben tényezők Kell (K) és (Rh-rendszer). Kell tényező a második pozíció után a léptéktényező D transzfúzió veszélyes antigének eritrociták. Harmadik helyen megy a tényező.
érzékenyítés a lakosság index (százalékban egyének fokozott transzfúzió utáni szövődmények), hogy mindkét tényező jelenleg magas.
Abszolút értelemben, az index és érzékenységet az antigén a Kell rendszer figyelembe veszi a 10 előző év áll a számított adatok 8-10 millió ember, azaz mintegy 6-7% -a az összes lehetséges címzettek erre benchmark.
Annak érdekében, hogy a transzfúzió utáni szövődmények antigén K, meg kell kiadni az egészségügyi intézményekben csak a K-negatív vörös vérsejtek. Az irodák, fióktelepek, állomások vérátömlesztést kell végezni, hogy a definíció az antigén szükség, az adományozók együtt a csoport, és Rh-faktor, és válassza ki a K-pozitív vért, ami nem teszi lehetővé számukra, hogy kiadja a transzfúzió. K-pozitív donorok kívánatos ajánlani egy másik fajta adományozás (plazma, vérlemezkék, fehérvérsejtek és mások.), De nem a vörös vérsejtek.
Az antigén kimutatására a vörösvérsejtek által termelt hagyományos módszerekkel kutatási:- Indirekt Coombs tesztet.
- Zselatin módszer kémcsövekben.
- Gyors módszer a síkon anti-K szérumot univerzális ( "Gemostandart", Budapest).
Annak vizsgálatára, a gyors módszert alkalmazzuk a friss (nem több, mint két nap tárolás), mosatlan vagy mosott vörösvérsejtek, vett az alján a csövek ülepítés után a szérum (3. frakció vérben), a plazma egy tartósítószert vagy sóoldat. Használt egészében vett vér ujjbegykapillárisból csak a vizsgálat előtt.
Ennek során a meghatározás:- van elhelyezve a gépen két csepp (1 ml) anti-K szérumot és egy csepp vörös vérsejtek mennyisége 1/3 térfogat levett szérum;
- drazsék és keverjük egy üvegbottal egy sima periodikus rázkódás lemez megfigyelni a reakció előrehaladását 5 perc alatt.
Amennyiben pozitív eredményt jelenik agglutinációját eritrociták 30 s - 1 perc és azt követően amplifikáljuk a negatív eredmény, agglutináció nem. Miután 3-4 percig, reakcióelegyhez 1-2 csepp sóoldatot eltávolítására lehetséges nemspecifikus aggregációját az eritrociták és a megfigyelés addig folytatjuk, amíg 5 perc, ami után az eredmény regiszter.
Előfordulás antigénnel (Rh rendszer) körülbelül 80%. Körülbelül 20% -a nem tartalmaz antigént, és homozigóta a allélikus antigén C. Ennek megfelelően, ezek a betegek 80% -a transzfundált vörösvérsejtek tartalmazó antigént, ami túlérzékenységet és a kockázat a transzfúzió utáni komplikációk. túlérzékenységet a lakosság index egy antigénhez körülbelül 32%.
Annak érdekében, hogy csökkentsék a túlérzékenységet a lakosság index, és ne a transzfúzió utáni komplikációk által okozott összeférhetetlensége az antigén, helyénvaló az egyes Rh-pozitív címzett számára, hogy az antigént és hiányában a vér transzfundált a recipiens donor homozigóta a C antigén, azaz, negatív. Állomásokon és a vérátömlesztés osztályok tanácsos egy biztonsági másolatot csoportja, adományozó vagy állomány-negatív vörös vérsejtek.
Az antigén meghatározásakor a standard anti-szérumot ( „Gemostandart”, Budapest) által azonos módszerekkel, mint az antigén D antigén kimutatására kell használni Colyclons C „Anti-C szuper” (monoklonális anti-S antitestek) ( „hematológus „Budapest). Colyclons „Anti-C-szuper” nem tartalmaz antitesteket más sajátosságok és nem igényel oldószeres kontrollal.
eritrocita fenotipizáltuk Lewis antigén rendszerként
Azonosítás Lewis-antigének és LE. LE b enzimes módszerrel inkomplett szokásos antitest anti-LE (a) anti-LE (L) ( „Gemostandart”, Budapest) áll előállítására egy működő enzimoldatot kezelés (enzimirovaniya) az oldattal a vizsgált és a referencia (kontroll) az eritrociták és beállítás enzimirovannyh agglutinációs vörösvértestek.
Ennek során a meghatározás:- Elkészítése működő enzim-oldatot.
Hogy előkészítse a munka enzimoldatot általánosan használt C-proteáz (proteáz komplex által termelt kultúra Arc. Chrysogenum).
Az is lehetséges, hogy bármilyen más szerológiailag aktív mikrobiális proteáz (szubtilizin, pronáz) vagy növényi (papain, bromelain) eredetű.
A szükséges mennyiségű 0,1% az enzim-oldatot készítünk oly módon, néhány percen belül szobahőmérsékleten mintát a használt enzim-készítmény fiziológiás sóoldatban (például, 10 mg enzimet feloldjuk 10 ml fiziológiás sóoldatban). Mikrobiáiis proteáz oldat készen áll a használatra után azonnal oldódó enzim. A fejlesztés enzimatikus aktivitásának papainoldatot tartottuk 1 órán át szobahőmérsékleten felbomlása után a gyógyszer. Érvényességi előállított mikrobiális proteáz oldatot (C-proteáz), tároljuk 4-8 ° C-on, - 1 hét, papáin oldatot -. 48 óra porszerű enzimkészítmények 4-8 ° C hőmérsékleten megőrzik aktivitásukat több éve.
- vizsgálták és szabványos (. + B- és az LE és az LE-b +) vörösvérsejteket kétszer mossuk fiziológiás sóoldattal;
- 1 térfogat csapadékot mosott eritrocitát adunk 5 térfogatrész enzimoldatot (például 3 az eritrociták cseppenként hozzáadunk 15 csepp enzim oldat);
- eritrociták és az enzim oldatot keverjük;
- csöveket összetevők helyeztünk egy száraz-levegős termosztát 37 ° C-on 45 percig vagy 30 percig vízfürdőben ezen a hőmérsékleten;
- után enzimirovaniya eritrocitákat kétszer mossuk az enzimoldat;
- 5-7,5% készített enzimirovannyh dolgozik eritrocitaszuszpenzió sóoldatban.
- vizsgálták az egyes minta és a standard (kontroll) eritrociták síkban elhelyezett 1 csepp szérum anti-LE (a) és anti-LE (L);
- sík felületre helyezzük reagenseket adunk 1 csepp enzimirovannyh eritrociták;
- reagenseket keverjük;
- inkubáltuk (nyugalmi) 10 percen át szobahőmérsékleten keverjük;
- figyelembe veszi a eredményeit agglutinációját eritrociták enzimirovannyh szabad szemmel, vagy egy 4-szeres hurok (mellett jó természetes vagy mesterséges fény elegendő, enyhe ringató sík) - jelenléte vagy hiánya az agglutináció.
Az eredmény kerül rögzítésre igaz ellenőrzése után kontroll mintát, hogy van, jelenlétében agglutinációs a pozitív kontroll és hiánya a negatív kontroll.
Prevalenciája fenotípusok Lewis rendszer donorok az északnyugati Magyarország: LE jól b- - 20%, és LE + b- - 3-5%, és a LE-b + 70%, míg Lea + b + - ritka.
Oldalak száma összesen: 10