Sejtkultúra - ez
Festett kultúra az epiteliális sejtek. A fotó keratin (piros) és a DNS (zöld)
A sejttenyészet az a folyamat, amelyben az egyes sejtek in vitro (vagy egyetlen sejt) prokarióták és az eukarióták mesterségesen szabályozott körülmények között termesztik. A gyakorlatban, a „sejttenyészet” kifejezés általában a sejtek tenyésztése, amelyek ugyanabban a szövetben a többsejtű eukarióták, a legtöbb állat. Történelmi fejlődés a technológia és módszerek növekvő sejttenyészetek elválaszthatatlanul kapcsolódnak a termesztés szövet kultúrák és egész szerveket.
Az alapelvek a kultúra
sejt Isolation
Termesztésére élő sejtek kívüli szervezet is többféle módon elő. Sejteket izolálhatunk a vérből, hanem növekedni tenyészetben csak leukocitákban. Mononukleáris sejtek izolálható lágy szövetbe enzimek, például a kollagenáz, tripszin, pronáz, extracelluláris mátrix elpusztítja [3]. Ezen túlmenően, a tápközeg lehet helyezni darab szövet. A sejteket közvetlenül a tárgy, az úgynevezett elsődleges [4]. A legtöbb primer sejtek, kivéve a tumor, korlátozott hasznos élettartama. Miután egy bizonyos számú sejtosztódás vannak kitéve az öregedési folyamatot, és nem osztódik, de ne veszítse el életképességét. Vannak „halhatatlan” sejtvonalak képesek a szaporodásra, a végtelenségig. Ez a képesség az eredménye véletlenszerű mutációk. szerzett vagy mesterségesen, elnyomásával a telomeráz-gén [5].
növekvő sejteket
A sejteket speciális táptalajok, állandó hőmérsékleten, és egy speciális gáz-halmazállapotú környezetben sejttenyésztő inkubátorban [6] [7]. Táptalajok különböző sejttenyészetek összetételében különbözik, pH, glükóz koncentrációja, növekedési faktorok és a készítmény, stb [8]. A növekedési faktorok használt táptalaj leggyakrabban véréből nyert. Az egyik kockázati tényező ez a fertőzés lehetőségét vírusok vagy prionok szaporítósejteket. Végzett tenyésztésével egyik fontos feladata, hogy megszüntesse, vagy minimalizálják a fertőzött összetevők. A gyakorlatban azonban ez nem mindig érhető el. A sejtek szaporíthatok szuszpenzióban. vagy a ragasztó állapotban. Egyes sejtek (például a vörös vérsejtek) in vivo léteznek szuszpendált állapotban. Vannak is sejtvonalak mesterségesen megváltozott oly módon, hogy azokat ne lehessen csatolni a felszínre, akkor kerül sor annak érdekében, hogy növeljék a sejtek sűrűségét a tenyészetben. Termesztésére adherens sejtek igényelnek felülete, például szövettenyésztő, vagy műanyag bevonatú extracelluláris mátrix elemek összekapcsolásának javítására a tulajdonságok és a növekedést és differenciálódást. A legtöbb sejt a lágy és a kemény szövetek ragasztással. Organotipikus típusú sejt kultúra kiemelkedik a ragasztó típusú kultúra, amely egy háromdimenziós környezetben, szemben a szokásos laboratóriumi felszerelés. Ez a kultúra a rendszer a legtöbb fizikai és biokémiai hasonló az élő szövetekben, de bizonyos technikai nehézségek szervizelése (például szoruló diffúzió).
Átfertőződésének sejtvonalak
Amikor dolgozik sejttenyészetekben, a tudósok is szembe a probléma a kereszt-szennyeződés. Ítélve az eredmények a kutatások, abból lehet kiindulni, hogy a 15-20% a sejtek kísérletekben alkalmazott voltak romlott, vagy arra szennyezett más sejtvonal sejteket [9].
Jellemzők sejtek tenyésztéséhez
Amikor a nő a sejtek miatt folyamatos osztás lehet bővelkedés őket kultúra. Ennek következtében előfordulhat, hogy a következő problémákat tapasztalhatja:
- Felhalmozódás a közegben a hulladék termékek, beleértve a toxikus.
- A felhalmozódás az elhalt sejtek a tenyészetben, életfunkciók megszűnését.
- Felhalmozódása nagyszámú sejt negatív hatással a sejtciklus, növekedését és osztódását lelassult, és a sejtek elkezdenek öregszik és meghal (kapcsolat a növekedés gátlását).
- Ugyanebből az okból, lehet kezdeni a sejtek differenciálódását.
Fenntartani a normális működését a sejttenyészetek, valamint, hogy megakadályozzák a negatív jelenségek időközönkénti cseréje a tenyésztőközegben, és passazhirovanie transzfektálás után a sejteket. A szennyeződés elkerülése érdekében a kultúrák a baktériumok, élesztők, vagy más sejtvonalak, Minden műveletet rendszerint úgy hajtjuk végre aszeptikus körülmények között steril dobozban. Hogy elnyomja a mikroflóra tápanyag tápközeget lehet hozzáadni antibiotikumok (penicillin,. Sztreptomicin) és gombaellenes szerek (amfotericin B).
Az egyik ilyen termék az anyagcsere a sejtek a sav, amelynek pH-ja a közeg fokozatosan csökken. Annak érdekében, hogy ellenőrizzék a savasság a táptalaj Hozzáteszik mutatók pH. Ha a kultúra a megtapadt sejtek, a táptalaj lehet teljesen cserélni.
sejt Passazhirovanie
Passazhirovanie (osztás) sejtek - válogatott kisszámú sejtek benövését a másik főzőpohárban. A tenyésztett sejteket fel lehet használni a sokkal hosszabb, ha rendszeresen elvégzi a kiválasztást Sejtanyagok, amely segít megelőzni a korai öregedés, a kultúra miatt megnövekedett sejt sűrűség település. Felfüggesztő kultúra passaged könnyebb, hiszen elég csak válassza ki a kívánt sejtek száma, őket más tartályban, és adjunk hozzá friss közegben. Adhesive ugyanezen sejtek előtt meg kell osztani. Leggyakrabban erre a célra használt keverékét tripszint és EDTA-t vagy más enzim-keveréket. A kisszámú diszkrét sejteket fel lehet használni feltölteni egy új kultúrát.
Transzfekció és transzdukciós
A sejttenyésztés mellett ezek idegen DNS-t lehet bevezetni transzfekcióval (egy nem-virális módszer). Gyakran ez a technológiát használják a ellenőrzött génexpresszió. Viszonylag nemrég erre a célra már sikeresen megvalósított transzfekciót RNSi.
DNS is bevezethető a a sejt genomjába keresztül vírus vagy bakteriofág. Úgy, hogy a sejten belüli paraziták, a legalkalmasabb erre a célra bevezetése óta genetikai anyag gazdasejt egy normális része életciklusuk során. [10] Ezt a módszert nevezik transzdukció.
A humán sejtvonal
Az egyik legkorábbi kultúrákban az emberi sejtek, nyert Henrietta Lacks elhunyt méhnyakrák. Kultúra nucleus sejtek kékre festett.
A humán sejtek tenyésztésével némileg ellentétes a szabályokkal bioetika. izolált és nőtt a sejtek képesek túlélni az anyavállalattal, majd kísérletek során felhasznált, illetve új kezelések és eredő nyereséget. Az első ítélet ezen a területen történt a Legfelsőbb Bíróság a Kalifornia állam esetében a „Dzhon Mur vs. UCLA képviselői”, amely szerint a betegeknek nem kell semmilyen tulajdonosi jogokat a sejtvonalak származó szerveket eltávolítjuk a hozzájárulásukat. [11]
A vonal „hibridóma” sejt
Egy hibridóma sejtvonal származik egyesülésével a normális sejtek „halhatatlan”. Előállításához használt monoklonális antitestek. A fehérvérsejtek izolált lépet vagy vér immunizált állatok, keresztezzük „halhatatlan” myeloma sejtvonal. Mivel myeloma rákos sejtek „halhatatlan”, amely képes megosztani a nagy mennyiségű időt, miután a kereszteződés és a megfelelő hibridóma kiválasztását. monoklonális antitesteket termelő az antigén elleni. Meg lehet tartani hosszú ideig.
Sejttenyészetek alkalmazásával
A tömegkultúra sejtek az alapja az ipari termelés virális vakcinák, és a különböző biotechnológiai termékek.
biotechnológiai termékek
Ipari eljárás előállított sejttenyészethez termékek, mint például enzimek. szintetikus hormonok. monoklonális antitest. interleukin. limfokineket, rákellenes gyógyszerek. Bár sok egyszerűbb fehérjékhez lehet viszonylag könnyen előállíthatók rDNS a baktériumtenyészetek, bonyolultabb fehérjék, mint például glikoproteinek, jelenleg csak előállíthatók állati sejtekben. Az egyik ilyen protein az a legfontosabb hormon, az eritropoetin. Az ára növekvő emlős sejtkultúrák elég magas, így most kutatásokat végeztek az a lehetőség, komplex fehérjék rovar sejttenyészetekben vagy magasabb rendű növények.
szövettenyészetben
Cell kultúra szerves része a kultúra technikák tissue és a tissue engineering, mivel ez határozza meg az alapokat a növekvő sejtek és fenntartani őket életképes állapotban ex vivo.
Használatával a sejt tenyésztési technikák jelenleg rendelkezésre álló gyermekbénulás elleni vakcina. kanyaró. mumpsz. rubeola. bárányhimlőt. Mivel a fenyegető influenza járvány. okozta, abban a pillanatban az Egyesült Államok kormánya finanszírozza azt a kutatást a vakcinák előállítására sejttenyészetek alkalmazásával.
Kultúra nem-emlős sejtekben
Kultúra növényi sejtek
Kultúra növényi sejteket általában szuszpenzióban egy folyékony közegben, kallusz tenyészetben vagy szilárd tápanyag bázis. Tenyésztése differenciálatlan sejtek és a kallusz igényel ragaszkodás bizonyos egyensúlyának auxin és citokinin növényi növekedési hormonok.
Baktérium, élesztő kultúra
Termesztésére kisszámú baktériumok sejtjeiben és élesztősejtek szélesztünk egy szilárd táptalajon alapján zselatin vagy agar-agar. A tömegtermelés használják a termesztés folyékony táptalaj (broth).
vírustenyésztést
Kultúra vírusok termesztik emlõssejttenyészetekben. növények. gombák vagy baktériumok. attól függően, hogy a természetes gazda egy bizonyos típusú vírusok. De bizonyos körülmények között lehet termeszteni a sejtek eltérő típusú.
Ebben az esetben, a sejttenyészet maga szolgál egy táptalajt, és a vírus replikációját.
Típusú sejtvonalak
Listája sejtvonalak
Lásd, amit a „tenyészet” más szótárak:
sejttenyészet - embryology állatok cm-es szövettenyésztő ... Általános Fejlődéstani: Szószedet.
szövettenyészetben - Fejlődéstani ANIMAL SZÖVETTENYÉSZTÉSI sejttenyészet - eljárás Animal termesztés speciális közegben után eltávolítja őket a szervezetből. Régen a modern tudomány, mert így a tanuló az alapvető biológiai folyamatok: a sejtnövekedést, a ... Általános Fejlődéstani: Szótár
Sejtvonal a törzs - egy sejtvonal, a törzs * kletachnaya lіnіya a törzsek * sejtvonal vagy c ... törzs 1. A sejtek többsejtű primer explantátumok, in vitro tenyésztett passzálásával (passzázs), fenntartásuk olyan állapotban a tenyésztési ... Genetics. kollégiumi szótár
Sejtkultúra - Festett kultúra epiteliális sejtek. A fotó keratin (piros) és a DNS (zöld) sejtek tenyésztése egy olyan folyamat, amelyben az egyes sejtek in vitro (vagy csak hengerállványhoz ... Wikipedia
szövettenyésztő - (explantáció), hosszú távú megőrzését és termesztés speciális táptalaj a sejtek, szövetek, kis szervek, vagy azok részei, izolált az emberi testből, állatok vagy növények. Ezt alkalmazzák a biológiában, hogy a tanulmány a szövetek, egyedfejlődés; ... Collegiate Dictionary
kultúra sejtek és szövetek - tartósítási eljárása sejtek életképes állapotban, részei a szövetek, szervek, vagy azok részei a testen kívül. A 2. emelet. 19. fejlesztése mikrobiológia, különösen az egészségügyi (szükség izolálása és vizsgálata mikrobák okozó fertőző ... ... Biológiai Encyclopedic szótár
Szövettenyészeten - Kultúra tќaney eljárás vegetatív növények. A tápoldatban helyezünk egy kicsit az oktatás szöveti sejtek. A sejtek elkezdenek osztani, és hamarosan a fiatal növény lehet ültetni a földbe. Lényegében ez a klónozás. ... ... Wikipedia
- A hidrogél maszk Hyalual. A peptid hidrogél arcmaszk Hyalual® WOW Maszk rMCP komplex, professzionális használatra. Hyalual® WOW Maszk felmentheti mindazokat a tulajdonságokat ... Tovább Vásárlás 4950 rubelt
- A hidrogél maszk Hyalual. A peptid hidrogél arcmaszk Hyalual® WOW Maszk rMCP komplex, professzionális használatra. Hyalual® WOW Maszk felmentheti az összes tulajdonságait ... Tovább Vásárlás 995 rubelt