Enzimek - biológiai katalizátorok fehérje jellegű
A kifejezés enzim jelenleg nem kétséges vonatkozik biológiai katalizátorokat protein jellegűek. A felfedezés a ribozimok - RNS-molekulák enzimatikus aktivitású - eddig csak az egyik kivétel ez alól az általános szabály. Kapott kristályos enzimek, mint 1000, a szerkezet a sokan tanulmányozták a modern fizikai-kémiai módszerek. Laboratóriumi szintézisét ribonukleáz és lizozim csak további bizonyíték a fehérje természetű.
Tanulás bizonyos anyagcsere reakciók, közbenső metabolit, szabályozási mechanizmusok a katalizátorok végezzük elsősorban tisztított készítménye Fermi-Ing. Erősen tisztított enzimkészítmények szükség van továbbá annak érdekében, hogy on-megbízhatóan adatok kinetikai, kofaktorok, az aktív centrumok a szerkezete és hatásmechanizmusa enzimek.
enzim izolálás és tisztítás módszerek - olyan módszerek izolálására és a fehérjék tisztítására.
Az enzim tisztítása kezdődik az enzim izolálása a nyers sejt-extraktumot tartalmazó számos más komponenseket. Kis molekulákat eltávolítjuk dialízissel vagy gélszűréssel, nukleinsavakat kicsaptuk hozzáadásával antibiotikumokat (sztreptomicin), stb A fő probléma, hogy külön a kívánt-fer-ment több száz kémiailag és fizikailag hasonló bel-ing. Ha a vezérlés fehérjék kiválasztására szállít egy csomó gond kutató, az enzim jelenlétében és annak összege minden szakaszában a kezelés lehet aktivitásának mérésével figyeljük. Általánosságban, aktivitás mennyiségét értjük enzim vagy biológiai anyag, amely tartalmaz egy olyan enzimet, amely bizonyos körülmények között történő átalakulását katalizálja egységnyi idő alatt olyan mennyiségben a reagens nevezett szubsztrátumot. Activity - a változás a szubsztrát mennyisége hatása alatt az enzim egységnyi idő. Megváltoztatva a szubsztrát megértsék csökkenő időegységenként a szubsztrát mennyisége, vagy növeli a termék mennyiségét. A „enzimaktivitás” lényegében azonos a „sebesség enzimes” reakció. Az enzimaktivitást egységben fejezzük ki aktivitást. Mivel a különböző kalkulációs egységek bevezetett rendszerek International (standard) aktivitás egységének. Ez hordozza a szimbólum „U” (egység-egység), és úgy definiáljuk, mint 1 umol szubsztrát / perc. A SI rendszer, mint egység enzimaktivitás segítségével „hengerelt” (Kat). Katalt jelentése 1 mol / sec.
1kat = 1 mol / s.
A méret túl nagy, a gyakorlatban, élvezze több kisebb értékeket, mivel nanokatala (nkat). Ez egy milliárdod vagy 10 -9 korcsoláyzott macska. Ehhez képest a nemzetközi egység a következő egyenlet
A laboratóriumi gyakorlat széles körben használt kifejezés specifikus aktivitást. Ehhez chisloctandartnyh egységek alakítjuk bármely egysége összehasonlítás. Ez lehet egy mg fehérje a mintában, vagy a térfogata a biológiai folyadék vizsgált. Meghatározása enzimaktivitás elterjedt modern klinikai laboratórium.
Amikor tanulmányozása kinetikája a reakciók, és egy olyan koncepció, alkalmazunk a molekuláris aktivitása. Ez azt mutatja, hogy hány szubsztrát molekula másodpercenként alakítjuk terméket 1 molekula enzim és használt összehasonlító jellemző aktivitását számos enzim.