Előadás - táptalaj és osztályozása
Tápkörnyezet a gerincét bakteriológiai. Ezek arra szolgálnak, hogy elváljon a vizsgálati anyag tiszta tenyészetek mikrobák tanulni azok tulajdonságait. Táptalajon létre optimális feltételeket a mikroorganizmusok szaporodását. A kompozíció a közeg kell olyan anyagokat tartalmaznak, amelyek szükségesek az építési minden összetevője a citoplazmában, azaz a minden forrását egy élő organizmus növekedését. Ezek az elsősorban közé nitrogénforrások, szén, hidrogén és oxigén.
A forrás a hidrogén és oxigén táptalajokon - víz. Nitrogénforrásként alkalmazhatunk szerves vegyületeket, amelyek: hús, hal, méhlepényben, tej, tojás, vér. Ennek eredményeként, pankreatin vagy tripszin hidrolízis a kapott termékek az úgynevezett hidrolizátumok tartalmazó nagy mennyiségű aminosavak és peptonok, jól felszívódik a legtöbb mikroorganizmus. A natív fehérje szívódik csak néhány mikroorganizmusok exoprotease. Hidrolizátumokat az alapján készítik el a médiában számos mikroorganizmus.
A szénforrás a mikrobiális patogének elsősorban a különböző szénhidrátok: mono- és diszacharidok, többértékű alkoholok, szerves savak és ezek sói.
Továbbá organogens, baktériumok szükséges szervetlen foszfort tartalmazó vegyületek, kálium, kén, nátrium, magnézium, vas és nyomelemek: kobalt, jód, mangán, bór, cink, molibdén, réz és mások.
Mikroorganizmusok kell teljesülnie hozzáadásával szervetlen vegyületek a sókat tartalmazó táptalajban KH2PO4 és K2HPO4 al. Nyomelemek, hogy működnek a katalizátorok kémiai folyamatok van szükség nagyon kis mennyiségben, és adja meg a táptalajt peptont, szervetlen sók és a víz. Együtt a fenti szerves elemek, sok mikroorganizmus van szükségük növekedési faktorok, azaz olyan anyagok, amelyek önmaguk nem képesek szintetizálni. növekedési faktorok, hogy hozzá kell adni a táptalajhoz, mint a kész terméket. A növekedési faktorok közé tartoznak a különböző vitaminok, a forrása egy olyan tápközegeket, amelyek hozzáadásával a tápközeghez a növényi és állati eredetű, amely az összetételében nikotinsav, pantoténsav, parabenzoynuyu sav, vitaminok A, B, C és mások.
A tápanyagokat mikrobák lehet megszerezni, ha az adott reakcióközegben, mint a mikrobiális sejt membrán permeabilitás függvényében módosulhat pH.
Követelmények a közegben.
1. A táptalajnak tartalmaznia kell a szükséges teljesítmény mikrobiális tápanyagokat.
2. Van a reakció pH-optimuma a faj termesztett mikroba. -
3. A táptalaj legyen elegendő a viszkozitás és a nedvességet, mert mikrobák táplálkoznak diffúziós törvények és az ozmózis.
4. Rendelkezik izotonitással és van egy konkrét redox potenciál (rH2).
5. A tápközeg sterilnek kell lennie, és ezáltal azt a lehetőséget, hogy nő tiszta tenyészeteket.
Tápanyag követelményeinek és fizikai feltételek, a különböző fajok a mikrobák változik, és ez kizárja a lehetőségét egy univerzális médium.
Állag megkülönböztetni a szilárd és folyékony táptalajon. Sűrű alapján készített folyékony oldathoz hozzáadunk a ragasztó anyagok, agar és zselatin! Agar-agar (maláj - zselés) - növényi eredetű termékek, kivont hínár. A vízben agar-agart feloldunk hőmérsékleten 80-86 ° C-on, ez megszilárdul 36-40, és ezért használjuk, hogy lezárjuk a tápközeg mikroorganizmusok tenyésztésére különböző csoportok hőmérsékleten optimális számukra.
Osztályozása táptalaj által összetételük és céljuk
1.Po összetétele táptalajok vannak osztva egyszerű és összetett
Megkülönböztetni csoport általános célú média - közös. Ez a csoport magában foglalja a hús-pepton (egyszerű nutrient broth), hús-extraktumot agar
2.Ko második csoportba tartoznak a környezeti választani, különleges és differenciáldiagnosztikája.
elektív közepes (szelektív lekérdezés, tárolása, dúsítás). Az elv a teremtés elektív táptalajok alapján az elégedettség alapvető biokémiai és energetikai igényeinek a faj mikroba, a kultúra, amelyre szánják, vagy hozzá kell inhibitorok, amelyek elnyomják a növekedését kísérő mikroflóra. Egy konkrét összetétel és a koncentráció a tápanyagok, nyomelemek, növekedési faktorok szigorúan meghatározott pH-érték vagy hozzáadásával inhibitorok optimális feltételeket biztosítanak a termesztésére egy vagy több mikroorganizmus-fajok. Amikor a vetés őket tartalmazó anyag keverékéből különböző baktériumok, az összes fog provyalyatsya mielőtt a növekedés típusú, amelyre a közeg lesz választható. Ilyenek például a szelekciós közeg sárgája húsleves selenitovy húsleves, szerda Ploskireva - a növekvő mikroorganizmus család intesztinális alkalikus pepton víz - a Vibrio cholerae.
Tojássárgája húslevest. Az MPB hozzá 10-20% szarvasmarha epe. Bile növekedését gátolja szakácsok és a levegő növények, de kedvező a reprodukciós a Salmonella.
Selenitovy húslevest. Ez áll a foszfát húslevessel kiegészített nátrium-szelenitet, ami gátolja a coccal flóra az E. coli szaporodását, de nem késlelteti a növekedést a Salmonella.
Szerda Ploskireva. Szilárd táptalajt tartalmazó inhibitorokat az Escherichia coli, fonókészülékek, de előnyös, a növekedés a Salmonella és Shigella, reprodukció, amely nem gátolt brillantzöld és epe-sókat.
Peptonvíz. Tartalmaz 1% peptont és 0,5% nátrium-kloridot. Közepes jelentése választható a klór vibriók mint ők jobbak, mint más baktériumok szaporodnak el a „éhes média”, különösen a lúgos kémhatású, mert ők maguk kiválasztó savas salakanyagokat.
Különleges környezetben. Szükséges baktériumok tenyésztéséhez nem növekszik egyszerű táptalajon. Egyes szervezetek egyszerű táptalaj kell hozzá szénhidrátok, a vér és a többiek., További tápanyagok. Példák egyszerű táptalajokat cukor és cukor húsleves agar Streptococcus (rendre előállítására BCH és IPA, amelyhez hozzáadunk 0,5-2% glükóz).
A pneumococcus és a meningococcus speciális közegben tejsavó és a tejsavó húsleves agar (előállítására a savó húslevest összekeverünk 1 rész BCH 2 rész friss szérummentes fogadására, a szérum agart adunk az olvadt IPA 10-25% steril ló vagy szarvasmarha szérum).
Differenciáldiagnosztikai közepes meghatározásához használt tartozó fajok a mikroba alapján a sajátosságait metabolizmusát. " Célja szerint a differenciál-diagnosztikai média megosztott a következő:
1. Környezet azonosítani proteolitikus mikrobák, tartalmazó összetételében tej, zselatin, a vér, stb
2. Az összes szénhidrátok és poliolok
kimutatására különböző szacharolitikus enzimek.
A szerkezet a differenciál-diagnosztikai adathordozókat kimutatására szacharolitikus tulajdonságok és redox enzimek, mutatók bevezetett: semleges vörös, savas fukszinnal, brómtimolkék, kék, rózsaszín, vizes savval (BP). Megváltoztatásával színe különböző pH, az indikátor jelenlétét jelzi az enzim és hasítását a bevitt összetevő a közegben.
Példák a differenciál diagnosztikai média:
Szerda Endo. Részei MPA kiegészített 1% laktózt és nátrium-szulfit fehérített bázikus fukszin (LED). Szerda Endo van slaborozovy színe. Használhatók a klinikai diagnosztikában a differenciálás bélfertőzések baktériumok, amelyek elbomlanak laktózt savas termékek képződésének a baktériumoktól, nem rendelkezik ezzel a képességgel. Laktozonozitivnyh telepeket mikrobák (E. coli) piros miatt magenta helyreállítást. A telepeket lactosonegative mikroorganizmusok - Salmonella, Shigella, stb .. -bestsvetny
A differenciál-diagnosztikai adathordozókat rövidek és kicsomagolta tarka sorban. Ez egy közepes szénhidrátokkal (Hiss közepes), BCH, tej, hús-pepton zselatin.
Hiss közegben készített alapján pepton vízben, amelyhez hozzáadunk kémiailag tiszta mono-, di- vagy poliszacharidok (glukóz, laktóz, keményítő, stb).
Kimutatására a pH-változások eredményeként sav képződését és lebomlását a szénhidrát adunk a táptalajhoz indikátor. Egy mélyebb hasítását termelt szénhidrátok gáznemű termékek (CO2, CH4 stb), amelyek alkalmazásával detektáltuk úszók - kis probirochek, leereszkedett a közegbe fejjel lefelé. Közepes szénhidrátokkal elkészíthetik sűrű és - azzal a kiegészítéssel, 0,5-1% agar-agar. Ezután elgázosítása befogott buborékos képződés (folytonossági) az oszlopban közegben.
A BCH része egy tarka sorozat, felfedezni a termékek hasadásával képződnek aminosavak és leptonok (indol, hidrogén-szulfid). A hidrogén-szulfidot érzékeli helyezve a BCH beoltás után a kultúra szűrőpapír csíkokat oldatával impregnálják ólom-acetát. Upon hasítása aminosavak kéntartalmú, hidrogén-szulfid szabadul fel, a papír megfeketedik képződése miatt az ólom-szulfid. Annak meghatározására, az indol használhat egy komplex mutató. Az indol képződik a hasítási triptofán, és ez lehet kimutatni, ha hozzáadjuk a tenyészetet, a BCH, ez a mutató. Jelenlétében indol MPB festett zöld vagy kék.
Nutrient agar, és a fő eltérés diagnosztikai közegben jelenleg rendelkezésre álló formájában száraz készítmények tartalmazzák az összes szükséges alkatrész. Ezeket a porokat csak kell hozzá vizet, és főzzük, majd öntés után sterilizálni.
Még dolgoznak a biológiában