Baktériumtörzs Citrobacter, immáron patogenitásában tényezők

Felhasználás: biotechnológia, hőre labilis enterotoxin, LT-toxin, toxoid, Citrobacter, vakcina. Összefoglaló izobeteniya: új törzsek Citrobacter 930 magas toxin-termelő képességét. A törzset letétbe helyeztük a gyűjtemény GISCO és egy sorozatszámot 244. A törzs lehet előállításához használt hőlabilis toxin és toxoid vakcina előállítására. 1. táblázat.

A találmány tárgya a biotechnológia és fel lehet használni, hogy hőt labilis enterotoxin (LT-toxin), és Citrobacter a toxoid vakcina előállítására.

A cél találmány egy törzs Citrobacter 930, amelynek megnövekedett toxint termelő kapacitását.

Strain Citrobacter GISCO N 244 jellemzik a következő tulajdonságokkal.

Amikor növekvő hagyományos univerzális táptalajokon hőmérsékleten 35-36 o C strain egy tápközegben felület megnövekszik, hogy nagy kolóniákat alkotnak. Amikor növesztünk folyékony Hottinger (pH 7,2-7,4), hőmérséklete 35-36 ° C, 20 órán át okoz egységes turbiditás kicsapódni.

Módszerei aktivitásának meghatározására LT enterotoxin-: szubplantáris egéren súlyú 15-16 g, 0,05 ml centrifugált 20-40 órás tenyészetével duzzanatot okoz mancsok legalább 120 mg. Aksenova EV 1980 intranazális 0,05 mg 20-40 órás tenyészetével elhalását okozza 95% a hím egereket 15-16 g-vel 20 percen át jelenségek tónusos görcsök és az asphyxia Voyno-Yasenetsky NK 1967 . Intramuszkuláris injekció 300 millió 20-órás mikrobiális húsleves kultúra sejtek okoz elhalása nyúl bőr 3,5 cm átmérőjű; tapasztalat vékony csuklópánt nyúl bélben beadva 500 Mill. bw 20 órás leves-tenyészetből pozitív eredményt ad (V / l = 1,2); Greta 56 o C-on 45 percig centrifugált 20 órás leves-tenyészetből duzzanatot okoz egerekben mancsát 30 mg, nyúl bőr anélkül nekrózis. Greta 100 o C 20-órás tenyészet nem okoz folyadék felhalmozódása izolált nyúl-hurkon egy vékony (V / l = 0,3).

Tárolási feltételeit a kultúra szárítás után leofilnoy növesztettük 0,3% IPA (pH 7,2-7,4), elöntött steril folyékony paraffinnal hőmérsékleten 4 o C

Környezetvédelmi szaporításra Hottinger húsleves (pH 7,2-7,4), amely 5% Nyúl eritrociták hőmérsékleten 35-36 ° C-on 20 órán át.

Ellenáll a penicillin, tetraciklin, linkomicin, eritromicin, chloramphenicol, ampicillin.

1. példa 0,1 ml 1 milliárd. Napi agar szuszpenziós tenyészetben sóoldatban bevetett steril táplevesben Hottinger (5 ml pH = 7,2-7,4), inkubáljuk egy termosztátban 36 ° C-on 20 órán át, centrifugáltuk 6000 fordulat / perc sebességgel, 7 percig. A kapott felülúszót (centrifugált) egy 0,05 ml térfogatban beadott subplanarno a bal hátsó mancs hím egereket 15-16 g 24 óra múlva az állatokat leöltük, éterrel és levágjuk a bokaízület lemértük torziós egyensúlyt, a centrifugált törzs Citrobacyer diversus GISCO N adta 244 a különbség a bal és a jobb láb legalább 120 ml, a fennmaradó 20 törzsek termelésére képes enterotoxin LT-65 és 90 mg közötti. Controls natív Hottinger steril táptalajt (pH = 7,2-7,4) és a meleg 56 o C-on centrifugált 20-órás tenyészetével 30-35 mg volt.

Az eredményeket a táblázatban.

2. példa 0,1 ml 1 milliárd. Napi beoltott agar-agar szuszpenziós tenyészetben Hottinger táptalaj (pH = 7,2-7,4), inkubáljuk egy termosztátban 36 ° C-on 20 órán át és 500 Mill. Bw szuszpenzió 1 ml térfogatban adunk be az izolált szegmenst nyúl belek vékony hajlékony csuklókat. 16 óra elteltével az állatokat leöltük, és a levegő embólia számított váladék térfogat arány, hogy a hossza a szegmens (V / l). Ebben a 20-órás tenyészetével törzs Citrobacyer diversus GISCO N 244 képes volt előállítani egy folyadék felhalmozódását a nagy mennyiségű, és az index v / l volt, 1.2. A fennmaradó 20 törzs, amely képes a JIT enterotoxin komponens v / l között volt 0,9-1,0. Beadva steril táptalaj Hottinger és egy órán át melegítjük 100 ° C-on 20 órás tenyészetével a felhalmozódott folyadék térfogatarány, hogy a hossza a szegmens volt 0,25 és 0,3 volt.

Bakteriális törzs Citrobacter GISCO N 244, amelynek patogenitás faktor komplex.