bakteriológiai módszerekkel

kenet mikroszkópos

Mycobacterium tuberculosis van formájában vékony, enyhén ívelt rúd különböző hosszúságú vastagítások végeinél vagy a közepén, csoportokban vannak elrendezve, és egyenként (1a ábra) Festett Ziehl-Neelsen kenetek mikroskopiruyut merítés rendszert legalább 10 percig.

fluoreszcens mikroszkóp

A hátrányok LM módszer jelentősen magasabb költsége egy fluoreszcens mikroszkóp, egy eljárást okrashivaniya- megfelelés és kenet korrekciója pH, és a kibocsátás mikobaktériumok egy diagnosztikai anyagok (különösen a köpet) a környező nyálka, amely megakadályozza a behatolást a fluoreszcens festék a mikrobiális sejt. Ezért gyakorlatilag alkalmatlan LM natív köpet, de ajánlott, hogy ezt a módszert a tanulmány a kenetek elő a pellet centrifugálás után feldolgozott anyag a kultúra és a semlegesített után fertőtlenítő. Ezért LM módszert kell alkalmazni bakteriológiai laboratóriumokban, ahol a kulturális és mikroszkópos vizsgálat anyaga lehet ugyanazt a részét a diagnosztikai anyag.

Szövettani vagy citológiai vizsgálat néha észlelni jellemző tuberculosis keletkező sejteket védő reakció a szervezet, hogy a bevezetése tuberkulotikus bacillus. A jelenléte a citogramon Langhans óriássejtek kétségtelenül megoldja a diagnózis tuberkulózis. Ezek a sejtek nagyon nagy méretben (80-90 mikron vagy annál nagyobb átmérőjű). A citoplazma színezett szürke-kék színű. A kerületén van elhelyezve sorozat egy nagy számú mag (legfeljebb 20) elrendezett gyűrű alakban (1c ábra).

Egy másik funkció a tuberkulózis jelenlétét a készítményben úgynevezett epiteliális sejtek, amelyek fejlesztése és Langhans sejtek. Ez akkor fordul elő, amikor a magok száma elválasztása nélkül a citoplazmába, amely egyre nagyobb méretű (1. ábra, d).

Mikroszkóp segítségével gyorsan kap az eredmény, de van egy kis érzékenység és specificitás, a képtelenség, hogy különbséget saválló bacilusok.

1. ábra - a Mycobacterium tuberculosis
és - színező módszer Ziehl-Nelsenu
b - fluoreszcens mikroszkópia módszerrel
in - Langhasa sejtekben
R - epitheloid sejtek

A tenyésztési eljárás

A leggyakoribb módszer kimutatási Mycobacterium tuberculosis hazánkban a tenyészet. Ez a „gold standard” bakteriológiai diagnózis tuberkulózis, mivel az érzékenység sokkal magasabb mikroszkópos és így tiszta mikobakteriális kultúra későbbi azonosítására és jellemzésére gyógyszer-rezisztencia. Ez a módszer ad pozitív eredményt jelenlétében az anyagban 20 és 100 életképes mikrobiális sejtek per 1 ml. Azonban ez fáradságos és időigényes annak a ténynek köszönhető, hogy a tuberkuiózisbaciiusos nagyon lassan növekszik, és a kimutatási lehet regisztrálni csak 3 hét után a termesztés.

Történelmileg, a táptalaj tojás-alapú (Löwenstein-Jensen, Finn-2, Ogawa, Anikin, „Új”, Popescu) kapta a legnagyobb elosztó között sűrű táptalajon izolálására használt Hivatal. Vetés anyag Loewenstein-Jensen táptalajon végezzük bakteriológiai laboratóriumban. A növekedés az első telepeket a klasszikus média megjegyezte után 4-8 hét. Azonban az utóbbi években jelentek Middlebrook agar táptalajon (7N10, 7N11) gyorsan érzékeli mycobacterialis növekedés (kettőtől négy hétig), és jobb lehetőségeket nyújtanak a tanulmány a morfológia a telepeket, mint a tojás médiában. A hátránya, agar táptalajok szükségszerűség inkubációs inokulumot egy inkubátorban széndioxiddal, azonban agar-táptalajokon gyakorlatilag nem használják közé tartozik.

Meg kell jegyezni, hogy mivel a nagy szelektivitása különböző mikobaktérium törzs, valamint a szükséges kiváló minőségű fehérjék még nincs univerzális tápközegben. helyettesítheti az összes többi. A Rend № 109MZ Magyarország vetési diagnosztikai anyag MBT használata ajánlott ugyanabban a csőben nemzetközi tápoldatban Löwenstein-Jensen és Finn-2. A gyakorlat azonban azt mutatja, hogy amellett, hogy ezek a médiumok kell használni, és bármely más, a növény három csövek táptalaj is növeli a hatékonyságot a kultúra diagnózist.

A teljes kultúra diagnózis tuberkulózis kell a megfelelő felszerelés és berendezés. Különösen fontos a jelenléte a centrifuga és antiaerozolnoy védelme és a képesség, hogy biztosítsa a gyorsulás 3000g. Csakúgy, mint a biológiai biztonsági kabinok, hogy megakadályozzák intralaboratory fertőzés.

A fő hátránya a kultúra diagnosztizálása tuberculosis a vizsgálat időtartama alatt - három héttől három hónapig. Ezért további kutatások még mindig fontos a fejlesztési módszerek felgyorsítása mycobaktériumok növekedését.

BACTEC rendszer

A tenyészet diagnózis tuberkulózis jelenleg tapasztalható alapvető változások végrehajtásával kapcsolatos gyakorlati ILO teljesen automatizált tenyésztési rendszerekben. A fő különbség ezek a módszerek - a folyékony tápanyag táptalajok, majd radiometriás (BACTEC 460), kolorimetriás (Mb-Bact, BAC tALERT) és fluoreszcens detektálás növekedés (BACTEC MGIT 960). Office folyékony tápközegben tenyésztve az ilyen rendszerekben lehet kimutatni már ezt követően 1 - 2 hét, attól függően, hogy a kezdeti mennyisége a diagnosztikai anyagot. A felismerési arány Mycobacterium csak valamivel magasabb, mint a szilárd táptalajon. Az automatizált rendszerek a megfelelő BACTEC tartalmazó ampullákat különböző anti-TB gyógyszerek, csökkenti az időt a vizsgálati gyógyszer rezisztencia a mikobaktériumok, 10 - 14 nap.

Ezeknek automatizált rendszerek a leghatékonyabb rendszer jelenleg BACTEC MGIT 960BD. MGIT injekciós üveg folyékony tápközegben tartalmazhat 7H9 alsó része egy szilikon fluoreszcens indikátor „befagyasztjuk” magas oxigénkoncentrációt. A mikobaktériumok jelenlétével a felszívódását oxigén növekedése során a jelzőfények, a fluoreszcencia regisztrációs sisieme BACTEC MGIT automatikusan. Használata palackok MGIT lehetséges és „kézzel”, majd ellenőrizze a fény által termelt átvilágító a MGIT ampullák 11 nap.

A fő hátránya a MGIT BACTEC, valamint más BACTEC rendszerek a magas költségek berendezések ($ 100,000), és a palackokat a közép - vetés minta diagnosztikai anyagköltség 400 rubelt.

Vetés L-formában Mycobacterium

Az úgynevezett hibás sejtfal az L-alakú bacillusok és más fertőző patogének az eredménye a változékonysága és a fő típusa perzisztencia, vagyis a tapasztalatok kedvezőtlen körülmények között. Vetés L-forma különösen hatékony a tüdőn kívüli tuberkulózis, MBT vegetáció gócok emelt acidózis VLT és anaerob körülmények között, csökkenti azok életképességét és enzimaktivitás.

A diagnózis nem lehet csak az alapján kimutatási mycobacteria L-formák, de a felismerés, különösen akkor, ha az ellenőrzés a PCR módszer egy erős érv a tuberkulózis betegség természete. A gócok extrapulmonalis TB korábban bekövetkezik L-transzformáció mikobaktériumok, így a felfedezés lehetővé teszi diagnosztizálni a korai szakaszában a betegséget.

Általános információk és kereskedelmi